粗脂肪的定量測(cè)定-傳統(tǒng)索氏標(biāo)準(zhǔn)法

一、實(shí)驗(yàn)原理

脂肪是丙三醇（甘油）和脂肪酸結(jié)合成的脂類化合物，能溶于脂溶性有機(jī)溶劑。

本實(shí)驗(yàn)用重量法，利用脂肪能溶于脂溶性溶劑的這一特征，用脂溶性溶劑將脂肪提取出來(lái)，借蒸發(fā)除去溶劑后的稱量。整個(gè)提取過(guò)程均在索氏提取器中進(jìn)行。通常使用的脂溶性溶劑為Diethyl Ether或沸為30~60℃的石油醚。用此法提取的脂溶性物質(zhì)除脂肪外，還含有游離脂肪酸、磷脂、固醇、芳香油及某些色素等，故稱為“粗脂肪”。

二、實(shí)驗(yàn)用品

（一）器材

 （1）水浴鍋。

 （2）烘箱。

 （3）索氏提取器一套，研缽一個(gè)。

 （4）脫脂濾紙及脫脂棉花。

 （5）分析天平。

（二）試劑

   無(wú)水Diethyl Ether（AR）

（三）材料

   樣品（芝麻、花生、大豆或玉米）。

三、實(shí)驗(yàn)程序

（一）操作方法

 1.裝置索氏脂肪提取器

2.樣品的制備

      將樣品置80~100℃真空烘箱烘至恒重，放冷后研成粉末，稱取樣品3.00g，放入干燥濾紙筒內(nèi)，以脫脂棉花蓋之。

3. 提取

    將盛有樣品的濾紙筒放入索氏提取器內(nèi)，注意勿使筒內(nèi)樣品高出提取器的虹吸管加入Diethyl Ether約占提取管容積1/3，以浸濕樣品，同時(shí)向已知重量的提取瓶?jī)?nèi)加入約占其容積1/3的Diethyl Ether。將儀器各部連接如下圖，夾穩(wěn)，并置于恒溫水浴鍋上，使提取瓶底部浸入水中，開(kāi)啟自來(lái)水，使水從冷凝器下孔流入，上孔流出，然后開(kāi)啟水浴鍋開(kāi)關(guān)，加熱水浴。當(dāng)溫度上升至Diethyl Ether沸點(diǎn)時(shí)，Diethyl Ether開(kāi)始沸騰，并形成蒸汽由連接管上升至冷凝器，蒸氣遇冷而成液體，滴入提取管內(nèi)將樣品浸泡，樣品的脂肪將逐漸溶于其中，當(dāng)液面超過(guò)虹吸管上端時(shí)，溶有脂肪的Diethyl Ether經(jīng)虹吸管流入提取瓶。調(diào)節(jié)水浴溫度至50~60℃，使Diethyl Ether每小時(shí)循環(huán)3~5次，提取時(shí)間視樣品性質(zhì)而定，通常要12~16h。

4.干燥及稱重

  提取完畢后，卸下的提取瓶，在水浴上蒸餾回收Diethyl Ether（避免著火）。清洗提取瓶外壁，zui后把提取瓶置104℃恒溫烘箱中烘至恒重。

5.結(jié)果處理

粗脂肪（%）=（m2-m1）×100/m

    式中：m——風(fēng)干試樣重量，

          ml——已恒重的抽提瓶重量，

          m2——已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，